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純上皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法
更新時(shí)間:2015-09-30   點(diǎn)擊次數(shù):786次

    因此培養(yǎng)在有膠原的底物上可能利于生長,另外人或小鼠表皮在以3T3細(xì)胞為飼養(yǎng)層(用射線照射后)時(shí),細(xì)胞易生長并可發(fā)生一定程度的分化現(xiàn)象。降低PH、Ca2 含量和溫度,向培養(yǎng)基中加入表皮生長因子,均有利于表皮細(xì)胞生長。

以表皮細(xì)胞為例,用皮膚表皮和分離培養(yǎng)法可獲得純上皮細(xì)胞,方法如下:

1、 取材:外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊,早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好,去角化層薄者,切成0.5-1平方厘米小塊。

2、置0.02%EDTA中,室溫,5分鐘。

3、換入0.25%胰蛋白酶中,4攝氏度。

4、分離:取出皮塊,用血管鉗或鑷子將表皮與層分開。

5、取出表皮,剪成更小的塊后,置0.25&胰酶中,37攝氏度,30-60分鐘。

6、反復(fù)吹打,制成懸液。

7、培養(yǎng):用80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過后,低速離心,吸去上清。

8、直接加入培養(yǎng)基細(xì)胞懸液,接種入培養(yǎng)瓶,CO2溫箱培養(yǎng)。主要的客戶是醫(yī)學(xué)院校,做實(shí)行面向的種屬重要是人,大鼠和小鼠,如今市面市情上雞、牛、馬、羊、兔種種指標(biāo)的盒子都有售,真不知道這些抗體是怎么來的。據(jù)我所相識,這些炎癥指標(biāo)依然有很大種屬特異性的。

 

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