豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
采用間接ELISA方法檢測(cè)血清中豬流感病毒H1N1的抗體。
本試劑盒敏感性達(dá)92%,比常規(guī)的血凝抑制試驗(yàn)敏感性高10倍;特異性為100%。
具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán),是國(guó)家*的ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
價(jià)格遠(yuǎn)低于國(guó)外同類產(chǎn)品,具有較強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)性
操作簡(jiǎn)單,2~3個(gè)小時(shí)即可得到結(jié)果,樣品處理量大
豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒使用說明書
【獸用名稱】
通用名:豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
商品名:無
英文名:H1 Subtype Swine Influenza Virus Antibody Test Kit
漢語(yǔ)拼音: Zhuliuganbingdu H1Yaxing ELISA kangtijiance Shijihe
【主要成分與含量】
1 抗原包被板 2塊 (96孔/塊)
2 陰性對(duì)照血清 (藍(lán)色蓋子) 1管 (1ml/管)
3 陽(yáng)性對(duì)照血清 (紅色蓋子) 1管 (1ml/管)
4 羊抗豬酶標(biāo)二抗(藍(lán)色蓋子) 1瓶 (20ml/瓶)
5 20倍濃縮洗滌液(白色蓋子) 1瓶 (30ml/瓶)
6 底物液A (紅色蓋子) 1瓶 (10ml/瓶)
7 底物液B(黑色蓋子) 1瓶 (10ml/瓶)
8 終止液 (藍(lán)色蓋子) 1瓶 (10ml/瓶)
9 樣品稀釋液 (黃色蓋子) 1瓶 (50ml/瓶)
10 血清稀釋板 2塊 (96孔/板)
11 說明書 1張
取動(dòng)物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。
【洗滌液配制】
使用前,濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫(20~25℃),并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解(在37℃水浴5~10分鐘),然后用蒸餾水作20倍稀釋(例如:每?jī)蓧K板用50ml的20倍濃縮洗滌液加上950ml水),稀釋好的洗滌液在2~8℃可以存放7天。
【樣品和對(duì)照稀釋】
樣品稀釋:在血清稀釋板中按1:40的體積稀釋待檢血清樣品(例如:195μl樣品稀釋液中加5μl待檢血清樣品)。
對(duì)照稀釋:陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照不用稀釋。
【注意事項(xiàng)】
1 試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,使用后放回2~8℃。
2 不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。
3 不要用口移液。
4 底物液B不要暴露于強(qiáng)光,避免接觸氧化劑。
5 未使用的抗原包被板切記不要撕開上面的封口膜。
6 待檢血清樣品數(shù)量較多時(shí),應(yīng)先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測(cè)血清,再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板,使反應(yīng)時(shí)間一致。
7 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。
8 嚴(yán)格按照操作說明書可以獲得的結(jié)果。
用于檢測(cè)豬流感病毒H1亞型HA蛋白的抗體,適用于豬流感病毒H1亞型的流行病學(xué)調(diào)查、臨床診斷及免疫抗體水平的監(jiān)測(cè)。
【使用方法】
1 取抗原包被板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),每孔加入稀釋好的洗滌液200μl,靜置3分鐘倒掉液體,并在吸水紙上拍干。再分別將稀釋好的待檢血清和 對(duì)照各取100μl加入到抗原包被板孔中,待檢樣品做1孔,陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔,每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37℃溫育30 分鐘。
2 甩掉板孔中的溶液,每孔加入稀釋好的洗滌液200μl,靜置3分鐘倒掉,再在吸水紙上拍干,共計(jì)洗滌5次,
3 每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100μl,置37℃溫育30分鐘。
4 洗滌5次, 方法同2。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5 每孔先加底物液A一滴(50?l)、再加底物液B一滴(50?l),混勻,室溫(18℃~25℃)避光顯色10分鐘。
6 每孔加終止液一滴(50μl),10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果(測(cè)定前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下)。
【結(jié)果判定】 以空白對(duì)照孔調(diào)零,在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630nm值。
試驗(yàn)成立的條件是兩個(gè)陽(yáng)性對(duì)照孔的OD630nm值相差應(yīng)<0.3,陽(yáng)性對(duì)照孔OD630nm值均應(yīng)≥0.8,且<2.0;陰性對(duì)照孔OD630nm值均應(yīng)<0.2。
根據(jù)公式,S:樣品測(cè)定孔OD630nm值;P:陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630nm值
如果S≥P×0.25,判為陽(yáng)性,S<P×0.25判為陰性。
【貯存與有效期】2~8℃保存,有效期10個(gè)月。
【規(guī)格】192孔/盒。
豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
【樣品制備】
豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
【作用與用途】