欧美成人精品一级在线观看,一区二区三区在线观看欧美日韩,91成年女人午夜毛片免费,中文亚洲一二三区av

技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 腺病毒型PCR檢測試劑盒反應五要素
腺病毒型PCR檢測試劑盒反應五要素
更新時間:2020-03-19   點擊次數(shù):1119次

腺病毒型PCR檢測試劑盒反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
盖州市| 台山市| 锦屏县| 固镇县| 平邑县| 乐清市| 湛江市| 伊金霍洛旗| 河南省| 小金县| 汝城县| 兰西县| 阳原县| 班玛县| 仁化县| 张家川| 乌鲁木齐县| 句容市| 江都市| 大竹县| 尖扎县| 临沧市| 彰化县| 万荣县| 沁源县| 济源市| 策勒县| 云浮市| 白玉县| 眉山市| 策勒县| 利辛县| 东乡族自治县| 台中市| 鹤峰县| 莱阳市| 高密市| 康保县| 刚察县| 庆云县| 定州市|