怎么區(qū)分ELISA試劑盒能否測手中的樣本
現(xiàn)在ELISA試劑盒查看的樣本中,除了細(xì)胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。關(guān)于ELISA試劑盒客戶來說,在試驗中或許用到不一樣的樣本,怎么區(qū)分所購的ELISA試劑盒能否測手中的樣本呢?
關(guān)于zui常見的細(xì)胞上清,咱們都知道,培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)程中,無分外狀況一般是10%的牛血清參與培養(yǎng)基中,經(jīng)過培養(yǎng)后,細(xì)胞的吸收耗費,zui后細(xì)胞上清中蛋白含量會很少,并且關(guān)于一般牛血清出產(chǎn)的來說,在出產(chǎn)進(jìn)程中現(xiàn)已去除了,所以對一般ELISA而言,不會影響抗體抗原的。
如elisa試劑盒沒有供應(yīng)專門用于血清血漿樣本的緩沖液,那么只要用已知濃度的待測政策蛋白參與所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測政策蛋白參與PBS緩沖液中一起查看對比,ELISA試劑盒即可知道該試劑盒是不是能夠直接用來測血清血漿樣本。
ELISA試劑盒靈敏度高是一大優(yōu)點,而這其實也是和檢測樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說來,如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個值因為與曲線是個“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
一般說來,診斷試劑的檢測范圍以ng/ml計。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實驗前應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)實驗的方法確定樣本是否在所購的范圍內(nèi),是很重要的步驟。