酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）
原理：人elisa試劑盒批發(fā)可用于測定抗體，也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）； ②酶標記的抗原或抗體（標記物）； ③酶作用的底物（顯色劑）。
ELISA過程包括：抗原吸附在固相載體上，這個過程稱為包被，加待測抗體, 再加相應(yīng)酶標記抗體，生成抗原--待測抗體--酶標記抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計的光吸收計算抗體的量。
根據(jù)檢測目的和操作步驟不同，有以下三種類型的常用方法：
a、間接法
此法是測定抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標本（含相應(yīng)抗體）與之結(jié)合。洗滌后，加人酶標抗球蛋白抗體（酶標抗抗體）和底物進行測定。
b、雙抗體夾心法
此法常用于測定抗原。將已知抗體吸附于固相載體，加人待檢標本（含相應(yīng)抗原）與之結(jié)合。溫育后洗滌，加人酶標板中。
c、競爭法
此法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，將特異性抗體吸附于固相載體。加入待測抗原和一定量的酶標已知抗原，使二者竟爭與固相抗體結(jié)合；經(jīng)過洗滌分離，zui后結(jié)合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關(guān)。
在線客服
