ELISA試劑盒入門
1、細(xì)胞上清:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
2、腦脊液:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
3、血清血漿:請(qǐng)加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。
A.血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
B.血漿標(biāo)本,推薦用EDTA的方法收集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè),標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融。
c.血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑;
D.標(biāo)本應(yīng)清澈透明,檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除。
E.請(qǐng)勿使用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè),否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。
4、組織勻漿液的樣本,要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,造成檢測(cè)結(jié)果的值偏低。
因組織勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐富,實(shí)驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行,否則就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體是加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,需稀釋時(shí),請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。
為了得到更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,一些ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)新手們還需多加了解技術(shù)內(nèi)容,公司每周都會(huì)為您精心整理出重點(diǎn)技術(shù)要領(lǐng),能夠熟練的掌握好這些之后再應(yīng)用到實(shí)驗(yàn)里面就會(huì)簡(jiǎn)單的多。以上是ELISA試劑盒的一些技術(shù)要點(diǎn)